Estudo Molecular de Marcadores para Doenças Metabólicas - Análise da Mutação LEP G25848a

Autor(es): Osana Juliana Valeriano Lopes de Almeida, Geraldo Jose Argolo Ferraro

Introdução: A leptina é um hormônio polipeptídico secretado principalmente pelo tecido adiposo com um importante papel na regulação da ingestão de alimentos e metabolismo energético. O gene da leptina foi descrito pela primeira vez em camundongos e a partir deste estudo foi possível entender que a presença de mutações no gene da leptina tem relação com a elevação do índice de massa corpórea e ganho de peso, sendo, portanto, um fator importante no estudo de doenças metabólicas e do sobrepeso. Objetivo: Determinar o perfil molecular do gene leptina em população de adultos atendidos no Ambulatório de Obesidade do Centro Médico de Brotas (EBMSP), Salvador-BA. Metodologia: Amostras clínicas: 98 pacientes consecutivos acompanhados na Clínica de Endocrinologia do ABAB-Brotas,aceitaram, mediante assinatura de termo de consentimento livre, doar material sanguíneo para esta pesquisa, a partir de punção venosa em tubos com EDTA; extração de DNA: realizada com o uso do reagente DNAzol(invitrogem), conforme instrução do fabricante; quantificação do DNA: espectofotometria; eletroforese: gel de agarose a 10% e 1% de brometo de etídio, leitura em UV com trasiluminador; PCR: utilizou-se de um mix composto por 2,0uL de dNTP, 3,0uL de primer mix, 2,0uL de buffer 20mu, 0,4 uL de taq, 3uL de DNA, que foi submetido a termociclagem: 95ºC durante 1 minuto, 1 vez, 94ºC, 70ºC e 72ºC respectivamente, durante 1 minuto por 30 vezes, 72ºC por 5 minutos, 1 vez e conservado a 10ºC. Resultados/Resultados esperados: Até o momento identificou-se inadequado um dos reagentes que está em processo de substituição.

Palavras-chave: genética; obesidade; leptina; polimorfismo.

voltar
Anais da MCC., Salvador, v.1, n.3, setembro. 2012, ISSN

Av. Dom João VI, 274 - Brotas - CEP: 40285-001
Salvador/Ba Tel: 2101-1900 Fax: 3356-1936
http://www.bahiana.edu.br